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发布时间:2023-06-29 点此:815次
说起HPLC,大家都知道是指高效液相色谱,P表示效能Performance。但其实,HPLC的蕞初涵义是高压液相色谱,P表示压力Pressure。
那为什么会有这样的转变呢?今天,我们就来说说液相色谱的泵。
从俄国科学家茨维特第一次命名色谱法,到1960年代液相色谱仪初现雏形,整整用了50年。
从隔膜泵到往复活塞泵,发展到现在,几乎所有的液相泵系统都是往复活塞泵的某种变形了。
那它是什么原理呢?
在节日里,吹气球的打气筒就是一个活塞泵。包括一根活塞,两个有方向的阀门,还有一个腔体。活塞向后拉,向腔体里吸气,活塞向前推,向外均匀的排气。
液相泵也是一样,有柱塞杆,也就是活塞,有单向阀,也就是有方向的阀门,还有泵腔。
柱塞杆往后拉,溶液从入口阀进入泵腔里。向前推,泵腔里的液体就会从出口阀排出腔外。
不过,这种方式,就像吹气球一样,吹一下,停一下,是不符合液相色谱要求的。
这样的一整套,被称为一个泵头。
一个泵头可以稳定输出一种液体,叫做单元泵。
那什么是四元泵呢?
大家有观察过浴室里的水龙头吗?
比如方法是20%的水和80%的甲醇,比例阀就会像红绿灯一样不断的切换,按照2:8的比例把绿灯时间分别分配给水相和甲醇。
二元泵的优点是有两个泵头,分别控制A和B的流量,再进行混合,由于泵头的精度高,混合比例的精度也会比较高。
四元泵可以使用四种溶剂,灵活方便。但四元泵只有一个泵头,混合是依靠比例阀的开合,所以混合精度会稍差一些。
大家是否发现,在使用仪器的时候,泵里的很多部件一直处于运动或者变化的状态。
比如泵腔里的柱塞杆,不停开启闭合的单向阀,还有算着时间做切换的四元比例阀。
固体小颗粒会加速柱塞杆的磨损,导致漏液;
阻碍单向阀的闭合,导致基线的波动;
颗粒的存在还会影响比例阀的准确性。
这也是为什么液相实验需要过滤流动相的原因之一,尤其是使用缓冲盐的实验。
另外,由于设计的原因,四元泵更有可能在工作中产生缓冲盐的析出,形成新的颗粒。因此,需要更加注意。
有意思的是,不同的仪器设计,会产生不同的说法。
比如安捷伦通常推荐A相为水相,B相为有机相。
这就和硬件设计有关,由于安捷伦的四元比例阀是垂直放置,混合点在阀的中间,为了使析出的缓冲盐能有机会继续溶解,所以要求水相放在下面两个通道,A相和D相。
而有些公司的比例阀是水平放置的,就没有这个说法,反而推荐A相为有机相。
蕞后,总结一下,我们讨论了泵的结构和分类,有单元泵、二元泵和四元泵。
其实除了这种分类,还可以分为分析泵和制备泵。
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