液相色谱仪分析中气泡产生的原因及解决方案

是否有很多小伙伴和我一样，在使用液相色谱时会遇到仪器、管路等存在气泡问题，这些小气泡会影响实验过程的顺利程度及结果的可靠性，以下整理了几种出现气泡的情况以及对应的解决方法，大家如果遇到了，可参考对应着解决。

 1. 溶剂混合产生气泡 

 这种情况比较多见，特别是配置流动相时，两种或多种溶剂混合，会导致液体热力学体积的变化，易产生气泡，这种气泡通常比较明显，有些还会挂在瓶壁或管壁上，晃一下可以看到有许多小气泡存在液体中。 

 解决方案： 对溶剂过滤，超声脱气，或者仪器上加装在线脱气机，或者充氮脱气，同时保持室内恒温。 

2. 泵排气或吸液时产生不间断小气泡 

 这种情况有可能是过滤头被污染或部分堵塞，导致泵的吸力不均出现气泡。 

 解决方案： 根据过滤头的材质选择合适的处理方式，不可超声的可用10%的稀硝酸溶液浸泡后，用纯水清洗掉酸的残留；可超声的直接超声处理就可以了，必要时需更换新的滤头。 

3. 泵压力波动 

 泵压力非正常波动时要注意，如果非管路气泡所致，就要考虑是否是单向阀或泵内部原因造成。 

 解决方案： 拆下泵头，用甲醇或异丙醇超声清洗单向阀、密封圈和泵头整体，用酒精棉花擦拭柱塞杆，必要时更换密封圈、单向阀、柱塞杆等。

 4. 进样时进气泡 

 进样时带入气泡，或者进样针中带入气泡。 

 解决方案： 多次冲洗进样针，在进样前，注意排除进样针里的气泡。 

 5. 色谱柱进气泡 

 解决方案： 这种情况气泡比较难排，可尝试用纯甲醇小流速长时间冲洗反相色谱柱，随后逐步加大流速直至1mL/min，直至色谱柱压力平稳。或者更换色谱柱。 

 6. 流通池积存气泡 

 如果流通池积存气泡，会对基线噪音造成较大影响，基线会很乱。 

 解决方案： 在不接色谱柱的前提下，可采用突然增大流量的方法来除气泡；或者启动输液泵的同时，用手紧压住废液管出液端，使池内增压，然后放开，反复操作数次，可去除流通池内的气泡。操作过程中需要观察吸光度值的变化，如果变化剧烈，说明流通池内有气泡未排出，待数值基本不变时，说明排气泡成功，再观察基线是否趋于平稳。需要注意的是，增压的时候不要增加太多，以免造成流通池破裂。